AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：丝氨酸蛋白酶抑制剂肽酶抑制剂进化枝C成员1的敲低抑制NPC细胞的生长。
Serpin 肽酶抑制剂进化枝 C 成员 1 (SERPINC1) 在抗凝和抗炎中发挥作用。本研究的目的是研究SERPINC1在NPC细胞增殖和凋亡中的作用。此外，SERPINC1 基因在 HNE3 细胞系中使用靶向 SERPINC1 的短干扰 RNA (SERPINC1-siRNA) 沉默。通过 Cell Counting Kit-8 测定确定细胞活力；此外，通过流式细胞术研究增殖和凋亡。进行蛋白质印迹和逆转录-定量聚合酶链反应分析以确定蛋白质和mRNA的表达水平。结果表明，与邻近健康组织相比，NPC组织中SERPINC1 mRNA和蛋白质的表达水平增加。SERPINC1-siRNA转染后HNE3细胞中SERPINC1 mRNA和蛋白的表达降低。此外，敲除 SERPINC1 可促进细胞凋亡并抑制增殖。还证明沉默 SERPINC1 上调Bcl-2相关 X 蛋白和 p53 mRNA 和蛋白的表达，并下调 Bcl-2、存活蛋白和细胞周期蛋白 D1 的表达。SERPINC1 的下调降低了磷脂酰肌醇 3-激酶 (PI3K)、蛋白激酶 B (Akt) 和哺乳动物雷帕霉素靶标 (mTOR) 的磷酸化。因此，敲低SERPINC1可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路促进HNE3细胞凋亡并抑制增殖。
Phosphatase inhibitors（Abmole，M752）在Western blot实验中用于防止研究中蛋白和脂类的磷酸化状态丢失，为蛋白磷酸化提供更加全面的保护。
Figure 1. Expression of SERPINC1 in NPC tissues.
进行RT-qPCR和蛋白质印迹分析NPC和邻近健康组织中SERPINC1的表达水平。 结果表明，与邻近组织相比，NPC组织中 SERPINC1 蛋白和 mRNA 的表达水平显著增加（P
Figure 2. Effects of SERPINC1‑siRNA transfection on the expression of SERPINC1 and the viability of HNE3 cells.
SERPINC1-siRNA 转染效率通过 RT-qPCR 和蛋白质印迹分析确定。结果表明，与阴性 siRNA 转染（空载体）对照组相比，SERPINC1 敲低后 HNE3 细胞中 SERPINC1 mRNA 和蛋白质的表达水平显著降低（P
Figure 4. Effects of SERPINC1‑siRNA transfection on the expression of apoptosis and cell cycle‑associated genes in HNE3 cells.
为了进一步研究 SERPINC1 敲低对 HNE3 细胞增殖和凋亡的影响，进行了 RT-qPCR 和蛋白质印迹分析以确定凋亡相关（Bax、Bcl-2 和存活蛋白）和细胞周期相关的表达、cyclin D1 和 p53) 基因和蛋白质。结果表明，与空载体组相比，SERPINC1-siRNA转染细胞中Bax mRNA的表达水平显著上调，而Bcl-2和survivin mRNA的表达水平下调（P
鸣谢：Jin Xu, et al. Mol Med Rep. 2019 May;19(5):3658-3666.