AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：血小板释放的三磷酸腺苷 (ATP) 的优化生物发光分析及其在血小板抑制剂高通量筛选中的应用。
活化的血小板释放三磷酸腺苷 (ATP)，ATP 释放的生物发光分析通常用于监测各种兴奋剂诱导的血小板活化。然而，ATP 的生物发光分析线性差，信号衰减快，血小板释放 ATP 的准确性难以准确确定，无法用于血小板抑制剂的高通量筛选。本研究旨在优化血小板释放的 ATP 的生物发光分析，并扩大其在血小板抑制剂的高通量筛选中的应用。结果表明，添加辅酶 A (CoA) 显着提高了 ATP 分析的准确性，并且在 Hank 平衡盐溶液 (HBSS) 和 Tyrode 缓冲液中添加牛血清白蛋白 (BSA) 大大推迟了 ATP 分析的信号衰减。此外，我们对 ATP 的优化生物发光分析准确确定了活化血小板的 ATP 释放以及 Ly294002 和 Staurosporine 对平板活化的抑制作用。因此，我们成功构建了优化的 ATP 生物发光分析，可用于血小板抑制剂的高通量筛选。
Staurosporine (Abmole, M2066,纯度99.68%) 是一种治疗剂，通过内在凋亡途径诱导细胞死亡来抑制肿瘤细胞生长。Staurosporine 是一种原型 ATP 竞争性激酶抑制剂，因为它以高亲和力与许多激酶结合，但选择性很小。
Fig 6. Screening of platelet inhibitors with optimized bioluminescence analysis of released ATP.
在优化释放的ATP生物发光分析的基础上，分析了Ly294002和Staurosporine 对活化血小板ATP释放的抑制作用，并评估了ATP生物发光分析在筛选血小板抑制剂中的应用价值。如图 6 所示，Ly294002 和 Staurosporine 均对凝血酶诱导的活化血小板的 ATP 释放表现出抑制作用，并且它们在 HBSS 和 Tyrode 缓冲液中表现出相似的抑制作用。
鸣谢：Lili Wang, et al. PLoS One. 2019 Oct 10;14(10):e0223096.