注意!血培养基残余DNA污染,可能是血流感染假阳性的重要来源丨ESCMID Global 2024

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编者按:虽然有各种临床研究提供了一些如何区分病原菌和污染菌的方法,但是目前还没有一个真正的“金标准”来区分血流感染病原菌和污染菌,可能导致临床假阳性。在当地时间2024年4月27~30日,于西班牙巴塞罗那举办的第34届欧洲临床微生物学和感染病学全球峰会(ESCMID Global 2024)上发布的一项研究表明,血培养基中的残余DNA污染可能是导致假阳性的重要原因。
背景
尽管血液培养存在其局限性,但它仍然是识别菌血症的基准方法。关键的感染控制任务,如追踪和报告院内感染以及监测血流感染率,在很大程度上依赖于准确区分污染和真正的菌血症。
血培养污染仍然是一个持续存在的挑战。事实上,已经确定了哪些微生物可能是污染物,哪些在几乎所有情况下都可以被认为是真正的菌血症。关于血液培养受到患者皮肤上细菌污染、血液采集过程中的污染等的讨论很多,然而,正如bioMérieux的一项研究所显示的,在血液培养基中发现残留的核酸(NA)是可能的,例如肠球菌粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等。因此,如果使用分子方法进行血培养诊断,就会引入污染问题,从而导致假阳性结果。
方法
为了评估血液培养基中可能存在的污染情况,研究者们测试了24份需氧血液培养基和24份厌氧血液培养基,并用无菌水替代临床血液样本进行注射。研究者们使用MagLEAD 12gC从这种基质中提取核酸(NA),并使用VIASURE铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌实时PCR检测试剂盒和DTPrime实时PCR仪器(DNA技术)进行分析。
结果
所测试的血液培养基显示以下结果(表1)。总体上,在这两种血培养基质中,铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌的DNA扩增率分别为22.92%、77.08%和85.42%。
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表1 VIASURE铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌实时PCR检测试剂盒结果
结论
这一现象应该在大规模范围内进行进一步研究,但已经发现许多血液培养基存在核酸污染。这可能会成为使用上的限制因素,因此,应考虑将分子技术作为血液培养基质量控制措施的一部分,以避免产生假阳性结果。
▌参考文献
E. Franco, et al. Challenges in the accurate detection of sepsis bacteria: assessment of residual DNA contamination in blood culture media.  ESCMIDN 2024, abstract O0512.