今天,走进开封这里!看它们如何“现原形”!

“病原体”一词,相信大家都不陌生,因为在日常生活中,人们经常会发生这样那样的疾病,不少疾病其实都是感染性疾病,而感染源,就是病原体。病原体是指可造成人或动植物感染疾病的微生物(包括细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体、立克次体等)。那么发生感染后,到底如何识别是何种病原体感染呢,今天让我们来一起走进河南大学淮河医院医学检验科,看看小小病原体,是如何“现原形”的吧!
一份样本的“现形之路”





首先,当怀疑某种病原体感染时,医生或实验室人员会采集样本,这些样本可能来自患者的血液、尿液、痰液或其他体液。样本的采集是第一步,也是至关重要的一步,因为它直接决定了后续检测结果的准确性和可靠性。接下来,样本会被送到实验室进行一系列的处理和检测。各种样本可不都是在一个实验室中完成检验的,有些被送到了微生物实验室,有些被送往基因扩增实验室,有些则去了免疫实验室,那么在每个实验室它们都会经历些什么,最终变成明确的检验报告到达患者手中呢?
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微生物实验室

常规培养项目48-72小时发出报告,血培养、脑脊液培养和胸腹水培养5个自然日内发出报告,各种涂片检验24h内发出报告。这是通常情况下,微生物实验室检测后出具报告的时间。


当一份样本送到细菌培养接种窗口,由工作人员接收样本、编号、分配培养皿,然后在生物安全柜里进行标本接种、涂片,接下来工作人员会将当天接种完成的培养基放入二氧化碳培养箱中,培养24小时后,从培养箱取出培养基,人工鉴别培养基上生长的菌落,结合标本质量和病历,筛选出可疑致病菌,进行细菌分离纯化。暂无可疑致病菌培养基放入培养箱继续培养至48小时,仍未发现可疑致病菌标本直接上报结果;发现可疑致病菌的,继续进行分离纯化。


分离纯化培养后的细菌,需要做细菌鉴定和药敏试验,判断此次患者感染的是哪种细菌,该菌对哪些抗生素敏感,指导临床用药。同时判定是否为多重耐药菌,如果是多重耐药菌,需要立即打电话报告给临床医护人员。


对于难以鉴定种类的细菌,医学检验科也有“利器”——质谱仪,这是一种专门用于细菌或其他微生物检测的仪器。工作人员会挑取目标菌涂靶板,滴加处理液后进行质谱鉴定。它不仅可以对临床分离的常见菌进行准确的鉴定,还可以对少见菌,如丝状真菌、布鲁氏菌等建立数据库。此外,质谱仪还可用于某些细菌的耐药性检测和耐药机制的研究,为临床合理用药提供指导,大大提高细菌鉴定的效率和准确性。

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基因扩增实验室

基因扩增实验室承担全院核酸检测项目,检验项目主要涉及呼吸道病原体核酸、肠道病毒核酸、传染病病原体核酸、特殊病原体核酸等。

每天工作开始前,工作人员要提前准备试剂。也就是把参与扩增反应的特异性引物、酶和离子等混合成相应的反应液,这个步骤是需要在试剂储存和准备区的超净工作台中进行的。在相对正压的工作环境下,试剂的充分混匀、现用现配、避免反复冻融等技术要求,是保证实验成功的关键,试剂配好后经传递窗传入标本制备区。

工作人员接收标本后,会先按检测项目分类,进行签收确认,录入检验系统、编号。未到检测时间的样本,妥善放入冰箱保存待检,可立即进行检测的标本,通过传递窗送入标本制备区。

标本制备区可以说是整个实验室的核心区域,疫情期间数以万计的标本曾在这里完成加样。工作人员首先核对标本架上的标本位置,这是加样正确的前提。加样完成后放入核酸提取仪进行15分钟的提取,将得到的核酸提取液加入到配好的反应液中。加样准确是最基本的要求,因为加入的成分都是以微升计算的,加完反应液和提取液的微量反应管管体积也只有20微升左右。最后微量反应管会经传递窗传递到基因扩增区进行扩增。

标本进入扩增区之后,经过简单的瞬时离心处理,就可以进行上机扩增。根据扩增仪预设的程序,进行多轮循环扩增,每个循环通过升温和降温,使目的基因得到指数扩增。这一过程通常需要1-2小时。

得到扩增曲线,工作人员将通过曲线的形状判读阴阳性或数值。在曲线和质控均无异常的情况下,方可报告样本结果。如遇到需要复查的情况,则重复上述加样、提取、扩增的过程,有时候甚至需要重新采样,出报告时间也将因此延长数小时。

最后,经过两名专业人员的核对,签发报告单,一张核酸检验报告就完成了。一份样本,从采集、送检,到核酸提取、扩增,再到检测分析、出报告,需要数个小时。为了做到早发现、早报告、早诊断、早治疗,大家争分夺秒,与时间赛跑,作为检测人员、作为临床医生的“第三只眼”,河南大学淮河医院医学检验科的工作人员以丰富的专业知识和严谨的工作态度,为临床提供可靠的诊断依据。
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免疫实验室

5个小时左右,这是当天实验开始前送到免疫实验室的样本出结果的时间。
目前,免疫实验室主要开展传染病病原体抗原和抗体检测,包括定性和定量,另外还包括一些感染性病原体抗体、自身免疫相关抗体检测等。

实验流程主要为:从接收标本窗口处取回当日的送检标本→扫码签收编号→样本离心→上前处理机器加样→检查标本是否合格→加对照,进后处理机器,经孵育、洗板、加酶、显色、终止等步骤,最后由自动酶标仪显色,判断结果。

对于累及血液、关节、肌肉、骨骼及关节周围软组织等全身各个系统的自身免疫性疾病,其自身抗体检测,通常使用印迹法、线性免疫分析法和间接免疫荧光法,尤其是间接免疫荧光法,结果判读需要在暗室对玻片进行人工镜检。

术业有专攻,

每个实验室都有
自己的一套法宝。



微生物实验室通过培养的方法找出痰液、尿液、分泌物、无菌体液等标本中存在的致病细菌,指导临床选择有效的抗生素。

基因扩增实验室通过提取咽拭子、肛拭子、分泌物、痰液、尿液、血液等标本中的核酸,扩增出靶基因,从而判断患者是否有某种病原体(细菌、病毒、支原体等)的感染,辅助临床诊断和用药。

免疫实验室通过抗原抗体的特异性,检测出标本中是否含有某种病原体的抗原或抗体,辅助诊断。

对于这些生物安全二级实验室来讲,遵循生物安全的要求是最基本的原则。不仅实验过程如此,检验完成后样本的处理同样重要。工作人员会严格遵守存放、标记、定期清理与销毁灭菌等规定,以确保每一个环节都安全、规范。



在河南大学淮河医院
医学检验科医生的手中,
每一个小小的病原体
就这样无所遁形,
只能乖乖显示出
它究竟是“何种妖孽”,
以便临床医生更精准地
为患者诊断,
并制定合适的治疗方案。

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全媒体记者:吴潇涵

值班编委:李蕙君
审核:杜趁义
编辑:唐志宇

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